肝脏的实验室评估
LaboratoryEvaluationoftheLiver
关键词：肝酶、胆汁酸、胆红素、肝脏疾病、氨
要点：
实验室检查有助于判断是否存在肝胆疾病、肝脏疾病是原发的还是继发的、以及监测肝胆疾病对治疗的反应或疾病的进程。
若血清丙氨酸转氨酶（ALT）长期升高（＞6周），则必须对动物进一步检查。
动物血清肝酶水平升高时，鉴别诊断应首先排除肝外疾病。
实验室检查正常的动物也可能有严重的肝胆疾病。
了解各项实验室指标的生物学差异对于准确判读十分重要。
简介
肝胆系统实验室检查的目的在于确定是否有肝胆疾病、判断肝脏疾病是原发的还是继发的、确定肝脏疾病的类型、并监测治疗反应或疾病进程。临床上要明确诊断肝胆疾病还是有一定难度的。首先，肝胆疾病的临床症状通常都是非特异性的，而且有很多动物实际上是亚临床表现的。此外，由于肝脏有很高的功能性储备，因此只有损伤了很大一部分功能性肝脏组织后才能出现肝脏衰竭的临床症状。很少能在没有活检的情况下做出特异性诊断。虽然有很多困难之处，但是实验室检查在识别、诊断犬猫肝胆疾病方面仍旧十分重要。本文主要回顾了目前常用于评估肝胆系统的实验室测试，并对它们的实用性与局限性做出了讨论。
参考范围与生物学差异
理解肝胆疾病实验室诊断测试的局限性有助于减少我们对结果的错误判读。一般来说，肝胆系统指标的血清或血浆活性水平的定量测试都是通过连续监测法测定的。我们需要根据一个参考范围和/或预定的阳性界值来对测试结果做出临床判读。参考范围的确定有很多种方法，最常用的方法是选取代表中间95%的健康对照动物的范围。因此，有5%的健康动物不在参考范围之内。不同的测试对象、不同的数据分布所对应的参考范围确定方法都有所不同。根据美国兽医临床病理学会的指南，试验至少需要40个测试对象。1严重肝胆疾病动物的测试结果可能是正常的，健康动物的测试结果也可能是异常的。并非所有在参考范围之外的测试结果都有临床相关性。为了减少对测试结果的错误判读，我们常常会使用一个阳性界值来做出诊断或反应。例如，某次检查中血清丙氨酸转氨酶（ALT）为U/L，虽然超出了参考范围的上限，但它还没有高到需要进一步检查的程度。
由于固有的生物异源性，不同动物的临床指标都会有所不同，检验机器的精确度也会影响到临床指标的差异性。我们要理解动物固有生物学异源性的存在与程度、并理解犬猫肝胆疾病生物学指标的临界值确定方法。近期的一项健康犬的研究显示，丙氨酸转移酶的临界变化值为47.7%。2因此在健康犬中，ALT水平需要升高至少47.7%才具有统计学意义。目前尚不清楚患有肝胆疾病的犬、以及有或无肝胆疾病的猫中各项指标的生物学差异性。
肝胆疾病的血清生物标记物
用于评估肝胆疾病动物的特异性实验室测试可分为3类：肝细胞损伤的标记物、胆汁淤积的标记物、以及各种肝脏功能测试（摄入、结合、分泌与合成）。
肝细胞损伤的标记物
丙氨酸转移酶
犬猫肝脏细胞的细胞质与线粒体中均有高浓度的ALT。血清ALT水平常用作犬猫肝细胞损伤的标记物，并被认为是肝细胞损伤的金标准标记物。3受到急性、不可逆损伤的肝细胞会释放出含有ALT的细胞质，进入细胞外腔，最终进入血液循环。肝细胞在可逆性损伤后也会释放出ALT，目前认为这是细胞膜泡状化导致的。4单靠测定血清或血浆ALT水平无法鉴别不可逆与可逆性肝细胞损伤。不过，可逆性或不太严重的肝细胞损伤后的ALT活性一般来说要比不可逆性或广泛性肝细胞损伤要更低一些。5ALT主要见于肝脏中，另外在骨骼肌与心肌中也有少量的分布。ALT有2种同工酶（即，ALT1、ALT2），可依照分子结构与组织特异性来区分二者。6根据免疫组织化学反应性，ALT1位于肝细胞、肾小管上皮细胞、以及唾液腺上皮细胞，而ALT2位于心肌细胞、骨骼肌纤维、内分泌胰腺的胰岛细胞、以及肾上腺皮质。7血清/血浆ALT水平被认为具有相对的肝脏特异性，但在偶然的肌肉损伤时也会出现升高。此时同时测定肌酸激酶有助于鉴别ALT是来源于肌肉还是肝细胞。临床上在测定总ALT水平时最好加上其他的一些有助于鉴别ALT来源的测试。
血清ALT水平升高一般见于肝细胞膜的可逆性或不可逆性损伤。肝细胞膜损伤的潜在病因包括炎性疾病、缺氧、中毒、药物、以及肿瘤（Box1）。皮质类固醇治疗与苯巴比妥治疗后相关的清或血浆ALT水平升高分别可能是酶合成增加和细胞损伤所导致的。8虽然血清ALT水平升高的程度和疾病严重程度与受影响的肝组织大小成一定的正比，但是在肝细胞数量大量减少（即，严重的纤维化、门体静脉分流）、非炎性的原发性或继发性肿瘤（如，干细胞肉瘤或肝血管肉瘤）、以及疾病的早期等情况下，ALT水平可能并不会升高。因此，单靠一个ALT测试并不能做出精确的诊断。而且还有多种肝外疾病与药物可导致血清/血浆ALT水平在肝脏疾病的早期、或者没有显著原发性肝细胞疾病时就出现明显的升高（Box2）。
血清ALT水平可在肝细胞损伤后12h升高，并在约24~48h后达到最高峰。9升高了的血清ALT降到基础值所需要的时间取决于潜在的疾病过程，例如，急性损伤与慢性炎症或感染性过程的恢复时间是不一样的。据报道，血清或血浆ALT在犬中的半衰期为40~61h，在猫中仅为3.5h。10因此在猫中，就算是很轻微的ALT升高，其临床相关意义也要比犬的更高。
在血清ALT水平升高时，根据笔者自己的经验指南，ALT在正常范围上限2倍内的可以在2周~6周后复检，可使用营养性肝保护剂治疗。而ALT在正常范围上限2~5倍内的则需要更多的诊断性检查，可能会包括胆汁酸、血氨、以及钩端螺旋体血清学和/或PCR测试。对于ALT升高超过5倍的，推荐立即进行更积极的诊断检查。长期持续的较低升高也可能需要更进一步的检查（Fig.1）。
天冬氨酸转氨酶
天冬氨酸转氨酶（AST）是另一种可用于标记肝细胞损伤的酶。AST广泛分布于骨骼肌、大脑、肝脏、肾脏、红细胞、以及心肌组织。11,12AST的肝外来源要比ALT的更广泛，肌肉损伤和溶血都可导致AST水平显著升高。因此认为AST的肝特异性要比ALT稍差一些。AST水平升高的病因与ALT的类似（见Box1）。将血清AST与其他肝酶与肌酸激酶结合在一起判读有助于临床医生鉴别是肝脏损伤还是肌肉损伤导致的AST升高。AST在犬中的半衰期约为12h，在猫中仅为1.5h。9血清AST升高的同时ALT也升高的情况被认为是肝细胞损伤的敏感性指标。
胆汁淤积的标记物
碱性磷酸酶
碱性磷酸酶（ALP）见于多种组织的细胞膜，包括肝细胞。有多种肝内与肝外过程都可导致血清ALP水平升高（Box3）。肝脏、骨骼、肠道、肾脏、以及胎盘中均有多种ALP同工酶。3目前学术界在猫血清ALP水平的具体来源方面尚存争议。犬猫中有2种基因编码ALP。13此外由于翻译后修饰过程的不同，同一个基因起源可发展出多种同工型ALP。肝脏ALP、骨骼ALP、以及肾脏ALP均转录于组织非特异性ALP基因。13犬的皮质类固醇介导性ALP与肠道ALP则为肠道ALP基因的同工型。14在犬中胎盘、肾脏、与肠道ALP的血清半衰期均小于6分钟。11猫的肠道ALP的血清半衰期小于2分钟，而猫的胎盘与肾脏ALP由于结构与肠道型相似，因此目前认为它们的半衰期也一样很短。11犬的肝脏ALP血清半衰期约为70h，而猫的为6h。11由于上述这些特性，犬的血清ALP水平中绝大多数来源于肝脏ALP、骨骼ALP、以及皮质类固醇介导性ALP，而猫的则来源于肝脏ALP与骨骼ALP。血清ALP水平升高提示原发性肝胆疾病，如胆汁淤积、以及胆小管细胞坏死、或肝脏合成升高。在胆汁淤积时，胆汁酸可导致磷酸酶活性增强，膜结合的肝脏ALP同工酶释放、可溶性升高。15最终，在胆汁淤积的动物中的血清ALP水平将显著增加。
碱性磷酸酶被认为是胆汁淤积的敏感标记物，有报道其敏感性可达85%。由于猫中ALP的半衰期很短，因此猫的ALP水平总体上并不会像犬的一样那么高，因此，ALP在猫的胆汁淤积上的敏感性要稍差一些。单靠血清ALP水平不能鉴别肝内与肝外胆汁淤积。有多种疾病可导致肝细胞水肿，进而导致肝内性胆汁淤积，从而引起胆小管阻塞与肝外胆汁淤积。肝损伤后ALP的升高要慢于肝细胞损伤指标的升高。这是因为碱性磷酸酶需要一定的时间才能合成、并被释放入系统血液循环。
从技术角度来说，是可以用如左旋咪唑抑制法等技术来选择特异性地测定糖皮质激素介导性ALP。理论上糖皮质激素介导性ALP的测定可用于鉴别ALP的升高是来源于皮质类固醇还是胆汁淤积。不过实际上测定糖皮质激素介导性ALP并不具备临床实用性，因为很多种情况都可以使这种酶升高，包括肝脏疾病、糖尿病、甲状腺机能减退、以及胰腺炎等。
γ-谷氨酰转移酶
γ-谷氨酰转移酶（GGT）是胆道上皮细胞与肝细胞的一种膜结合酶，也见于胰腺、肾小管、以及乳腺上皮细胞。16电泳研究表明，正常动物中的血清GGT主要来源于肝脏。16胆汁淤积、或胆道肿瘤的酶合成增加可导致血清GGT水平升高。在猫中GGT对肝胆疾病的敏感性可能要比ALP更高，因为猫的ALP半衰期很短。不过有个例外，猫脂质沉积症时ALP可中等到显著升高，而GGT则轻度升高或不升高。在犬中，和ALP相比GGT在肝胆疾病方面的特异性更高，但敏感性更差。外源性皮质类固醇给药或内源性皮质类固醇合成增加可能会导致犬血清GGT水平升高，这可能是因为酶合成增加的缘故，但血清GGT受继发性肝病或酶介导性药物的影响程度要比ALP的低。在抗惊厥治疗时（苯巴比妥、苯妥英、扑米酮等）血清GGT也可能会出现轻度到中度的升高。GGT在犬中的半衰期约为72h。17
肝脏功能测试
血清总胆红素
胆红素是血红素蛋白质的原卟啉部分氧化后的产物，这类蛋白质包括血红蛋白、肌红蛋白、以及细胞色素P-。18绝大部分的胆红素来自于单核-巨噬系统清除衰老红细胞的过程，这一过程经胞内微粒体血红素氧化酶催化，该酶可催化血红蛋白降解为铁、一氧化碳、球蛋白、以及胆绿素。胆绿素则被进一步分解为胆红素并被单核-巨噬细胞释放到血液中、转运到肝脏中并与白蛋白结合。18胆红素转运入肝细胞这一过程受配体蛋白转运蛋白或脂肪酸结合蛋白调节，胆红素在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的催化下与葡萄糖醛酸结合。18水溶性的结合胆红素被主动地从肝细胞内转运到胆小管，并作为胆汁的一部分进入小肠，最终被结肠菌群降解为尿胆素原。溶血症、原发性肝脏疾病、或肝外胆汁淤积都可导致高胆红素血症。
肝性高胆红素血症则可能是出于同期的肝细胞功能降低与肝内胆汁淤积。这些疾病可导致胆红素摄入、结合、排泄的减少。不过，只有在肝脏疾病十分严重时才会出现高胆红素血症，因此，血清总胆红素并不是肝脏疾病的一个敏感性测试。有多种疾病可导致犬猫高胆红素血症，最常见的见Box4。
肝后性高胆红素血症肝外胆道阻塞的继发结果。常见病因包括胰腺炎、细菌性胆囊炎、胆囊粘液囊肿、胆道肿瘤、以及胰腺肿瘤。肝外胆道阻塞通常可导致胆汁淤积相关酶的异常升高（ALP与GGT），同时肝细胞损伤相关酶（ALT与AST）的升高并不显著。此外，胆道阻塞时血清胆固醇浓度通常也会升高。肝脏超声检查通常有助于确定诊断并进一步指导治疗。如果可以的话，磁共振胆道造影术也可能可以提供更好的胆道影像检查。
测定血清结合（直接）与非结合（间接）胆红素对于鉴别肝前性、肝性、与肝后性高胆红素血症并没有太大的临床可靠性，因此临床上很少会做这两个测试。
胆红素会不可逆地与白蛋白共价结合。9胆蛋白质的血清半衰期与白蛋白的相当，且具有一定的临床意义，高胆红素血症（与黄疸）可在原发病因解决后持续数周的时间。
氨
氨主要是小肠中的肠道细胞与细菌通过去氨基作用代谢食物蛋白与胃肠道出血中的谷氨酰胺而形成的产物。20,21肠腔中的氨扩散通过小肠黏膜，进入肠系膜血液循环，并通过肝门静脉循环进入肝脏，最终以铵的形式被转运进入肝细胞。由于肝脏有很大的储备能力来将氨转化为尿素，因此血氨测试是肝功能的一个相对不敏感的指标，22目前认为只有肝脏功能减少超过70%时血氨浓度才会升高。23在胆汁淤积或肝脏疾病不影响门体循环、或还没有显著减少肝脏功能性组织时，血氨浓度并不受其影响。目前报道血氨对门体静脉分流的敏感性在81%~%（犬）和83%（猫）。23,24一般认为高血氨对肝功能不全或门体静脉分流具有特异性。不过，有时尿素循环酶缺乏也可导致血氨浓度增加。尿素循环酶缺乏可以是遗传的，即缺少某种特定的酶或继发于钴胺素或精氨酸缺乏。25,26精氨酸缺乏也见于肝脂质沉积症的猫，这有可能是脂肪肝猫出现高血氨的原因之一。血氨是肝性脑病形成中最重要的因素，因此血氨也是肝性脑病中最常用的指标之一。不过，肝性脑病动物的血氨浓度也可能是正常的，而且无法根据血氨来预测动物症状的严重性。27相反地，在某些没有明显肝性脑病症状的动物中血氨浓度也可能升高，不过在笔者的观点中，无论是否有临床症状都应该对高血氨做出治疗。有研究尝试使用氨耐量试验来提升血氨测试对肝功能不全和门体静脉分流的敏感性。口服铵盐可导致呕吐并可能加重肝性脑病。氯化铵或硫酸铵可以直肠给予，直肠给药所产生的不良反应要更少一些。不过在美国小动物临床中氨耐量测试并不常用，因为理论上有加重肝性脑病的风险。
需要注意的是，氨在血浆样本中并不稳定。因此，必须在30分钟内采血（使用预冷却的采血管）并完成检测分析。最好使用院内分析仪来快速测定血氨浓度，尽量避免院外送检。
胆汁酸
胆汁酸是肝脏使用胆固醇所合成的一种亲水脂性的类固醇，是胆汁的主要组成部分。胆汁酸可通过形成微团来增加肠道中脂质的溶解度，促进脂肪和脂溶性维生素的消化与吸收。血清胆汁酸常用于评估犬猫的肝脏功能。血清胆汁酸测试分为单独的餐前胆汁酸测试（禁食12h后），或餐前与餐后2h胆汁酸测试（胆汁酸刺激测试）。这两种方法的操作都很容易也很安全。胆汁酸血样在室温中比较稳定，可以送检院外实验室。不过，高血脂或溶血均会对胆汁酸的测试造成干扰。切除了胆囊的或有回肠疾病的动物的胆汁酸测试结果可能不可靠。禁食或餐后胆汁酸浓度升高见于肝功能不全、门体静脉分流、或胆汁淤积。因此在有胆汁淤积表现的动物中不应进行胆汁酸测试，如血清胆红素升高。在禁食期间可能会出现自发性胆囊收缩，这种现象可导致餐前胆汁酸比餐后胆汁酸高的情况；不过，在正常动物中这两个测试的结果都应该在正常参考范围内。血清胆汁酸的主要临床应用为评估怀疑有肝脏疾病、但血清胆汁酸浓度在正常范围内的动物的肝功能情况。单独的餐后胆汁酸测试和单独的禁食胆汁酸测试相比并无优势，但二者同时测定时可以提高胆汁酸测试的敏感性。22研究表明血清胆汁酸有助于肝胆疾病的诊断，包括犬猫门体静脉分流。22,24餐前胆汁酸浓度超过20μmol/L、或餐后胆汁酸浓度超过25μmol/L时，其对肝胆疾病的特异性为%。22一项研究发现禁食血清胆汁酸浓度对于犬猫门体静脉分流诊断的敏感度分别为93%（犬）与%（猫）。血清胆汁酸浓度对于肝功能不全的敏感度要比门体静脉分流的低一些。由于不同实验室使用的测定技术与方法有所差别，因此诊断中参考的正常数值必须根据具体实验室而定。
肝合成功能的标记物
肝胆疾病可导致蛋白质合成功能降低，并可影响葡萄糖、尿素、以及脂质的代谢。只有在肝功能损失约70%~80%时才会出现上述的生化异常。因此这些指标并不是肝胆疾病诊断的敏感性指标。而且一些非肝脏疾病过程也会导致这些指标出现异常。
肝脏在脂质代谢的过程中十分重要，包括胆固醇的合成。肝胆疾病动物的血清胆固醇浓度可能是升高、正常或下降的。血清胆固醇浓度降低可见于有严重肝功能不全、或先天性门体静脉分流的动物，这类动物的肝脏合成功能严重不足。其他可导致低胆固醇血症的病因包括可导致吸收不全或消化不全的胃肠疾病、饮食摄入减少、以及肾上腺皮质机能减退。很多种肝胆疾病的血清胆固醇浓度都可能在正常范围之内，而胆汁淤积动物可能有也可能没有高胆固醇血症。异常的血清胆固醇浓度对于犬猫肝胆疾病既无敏感性也无特异性，内分泌疾病、肥胖、蛋白丢失性肾病、蛋白丢失性肠病、胰腺炎、或原发性高血脂等都可引起血清胆固醇升高或减少。
肝脏在碳水化合物代谢的过程中也很重要。肝脏负责糖原储存、将半乳糖与果糖转化为葡萄糖、糖异生作用、以及利用碳水化合物做为基质合成多种物质等多种生化过程。肝脏对于糖异生作用有很大的储备能力。也就是说，肝脏功能要损伤很严重才会出现低血糖。先天性门体静脉分流的动物也会出现低血糖。在副肿瘤综合症中，由于某些胰岛素样物质的释放，也会出现低血糖。多种肝外原因均可导致低血糖。
肝脏主导蛋白质代谢，并负责血浆蛋白的合成、氨基酸的去氨基作用、将氨转化为尿素、以及氨基酸合成等过程。在动物患肝脏疾病时，这些功能均会受到影响。白蛋白只在肝脏中合成。靠肝脏合成与蛋白质降解的平衡，血清白蛋白浓度可维持相对稳定。有多种疾病紊乱可导致血清白蛋白浓度的轻微下降，但白蛋白的严重降低（＜20g/L）最常见于肝脏功能不全、蛋白丢失性肠病、蛋白丢失性肾病、以及严重的渗出性皮肤疾病。由于肝脏在白蛋白合成上有很高的储备能力，因此严重的低白蛋白血症并不是肝胆疾病的敏感性指标，主要见于严重肝脏衰竭或门体静脉分流的情况。
凝血因子（除了凝血因子VIII）、抗凝血因子、以及纤溶蛋白纤溶酶原等都由肝脏合成。肝脏也是维生素K依赖性凝血因子的激活部位，包括凝血因子II、VII、IX、X、以及蛋白C。此外，胆汁酸可乳化脂肪并辅助小肠吸收脂溶性维生素，包括维生素K。胆汁淤积可继发出现维生素K吸收不良，因此肝胆疾病可通过多种途径影响到凝血功能。有报道的凝血指标异常包括特定凝血因子血清水平、凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间，以及维生素K缺乏介导蛋白、纤维蛋白原降解产物、纤维蛋白原、和/或蛋白质C的浓度水平。28-33凝血异常不是肝胆疾病诊断的特异性指标，但是肝胆疾病可导致凝血指标紊乱。弥散性血管内凝血是肝胆疾病较少见的一种并发症，由于肝胆功能下降，临床上很难和凝血不良相区分。评估动物的凝血状态是住院护理中要做的标准检查之一，尤其是需要某些侵入式操作如肝脏活检或食道饲管安置等的时候。
血液学
肝胆疾病的动物可能有红细胞形态学异常或贫血。不过血液学异常对于肝胆疾病并没有特异性。
有报道的肝胆疾病动物中的红细胞形态学改变主要是异形红细胞症，包括棘红细胞、刺毛细胞、靶细胞、以及口形红细胞。34磷脂代谢异常与氧化耐受度下降被认为是上述这些红细胞形态异常的主要原因。肝脏疾病中裂红细胞的出现可能提示微血管病变化，后者可见于弥散性血管内凝血或肝脏肿瘤。
肝胆疾病的动物在侵入性操作或胃肠道出血时发展为急性贫血。此外，由于铁代谢的异常肝胆疾病动物也容易出现非再生性正细胞性正色素性贫血。长期的嗜血可导致铁缺乏性贫血，特征为小红细胞血以及红细胞血红蛋白含量不足。
肝胆疾病时有时可见凝血酶生成曲线出现变化。由于促血小板生成素合成减少或消耗性凝血不良，可能会出现血小板减少症。此外，某些可影响到肝脏的传染性疾病，如钩端螺旋体等也可能会造成血小板减少症。35
尿检
由于无法完全浓缩尿液，肝病动物的尿比重可能会降低。尿液浓缩能力的下降也会导致多尿的症状。此外，肝性脑病也可能会导致多饮。
胆红素尿与尿酸盐尿结石或尿结晶的出现可能提示肝胆疾病的存在。在犬猫尿液试纸检查中，胆红素一般是半定量测定的。健康的犬可出现一定程度的胆红素尿（试纸＜2+），尤其是公犬。当犬出现蛋白尿、结合于白蛋白的非结合胆红素随着白蛋白一起丢失，也可能出现不伴随有溶血性疾病或肝胆疾病的胆红素尿。和犬相比，猫的肾脏对胆红素的排泄阈值要高得多，因此无论猫出现多少程度的胆红素尿，都应该引起我们的注意并仔细检查。肝胆疾病的犬猫有可能会出现尿酸铵盐结晶尿。肝尿酸氧化酶可将尿酸转化为尿囊素，若动物因肝胆疾病而出现肝尿酸氧化酶缺乏，则血清尿酸浓度可能会升高，加上同期的高血氨血症，就会形成尿酸铵结晶尿。一项调查显示，在患有门体静脉分流的犬猫中有40~70%的犬和15%的猫被检测出有尿酸铵结晶尿。36
肝脏疾病的新型生物标记物
蛋白质C是一种维生素K依赖性蛋白酶原，由肝脏合成，在凝血方面有很重要的作用。有报道称血浆蛋白质C测定有助于诊断肝脏疾病。32有关犬先天性门静脉畸形的研究表明，蛋白质C是一种门静脉血流的非侵入式测定方法，在区分门体静脉分流与微血管发育异常方面有一定的作用。蛋白质C活性超过70%则提示为微血管发育异常而不是先天性门体静脉分流。若门体静脉分流纠正术后的蛋白质C活性升到70%或以上则提示门静脉血流得到了足够的恢复。
微RNAs是一种小的未编码的，负责调节转录后基因表达的RNAs。37多项动物模型与人类患者的研究表明，在血清ALT水平正常或升高时，肝脏起源的微RNAs是肝细胞损伤的稳定的与敏感的非侵入式生物标记物。其中有多个研究表明肝细胞源性微RNAs对于肝细胞损伤的敏感性要高于血清ALT。38-40近期的一项拉布拉多犬的研究发现，微RNA-对于肝细胞损伤有很高的敏感性与特异性，和ALT相比更容易检测出肝细胞损伤。41研究还发现微RNA-可鉴别出高肝铜浓度但ALT正常的动物。41
透明质酸是一种非硫酸化的粘多糖，分布于结缔组织中，是胞外基质的主要组成部分之一。透明质酸被用作肝脏纤维化的血清学标记物，有报道其鉴别轻度纤维化与中度到严重纤维化动物的敏感性为75%~87%，特异性为80%~%。42初步研究表明，血清透明质酸可能可用于犬肝脏纤维化的诊断。一项犬肝脏疾病的研究表明，肝硬化的犬的血清透明质酸浓度要远高于那些没有肝硬化、健康、或患有肝外疾病的犬。43
近期法国爱科森（Echosens）推出了一项FibroVet测试。该测试的专有算法结合了动物的年龄、性别、以及多种生化指标。一项以论文摘要发表的研究称该指标对中度肝脏纤维化诊断的阴性预测值为90%~%，鉴别肝脏纤维化犬的阳性预测值为90%%。44
REFERENCES
FriedrichsKR,HarrKE,FreemanKP,etal.ASVCPreferenceintervalguidelines:determinationofdenovoreferenceintervalsinveterinaryspeciesandotherrelatedtopics.VetClinPathol;41(4):–53.
RuauxCG,CarneyPC,SuchodolskiJS,etal.Estimatesofbiologicalvariationinroutinelymeasuredbiochemicalanalytesinclinicallyhealthydogs.VetClinPathol;41(4):–7.
OzerJ,RatnerM,ShawM,etal.Thecurrentstateofserumbiomarkersofhepatotoxicity.Toxicology;(3):–.
LemastersJJ,GoresGJ,NieminenAL,etal.Multiparameterdigitizedvideomicroscopyoftoxicandhypoxicinjuryinsinglecells.EnvironHealthPerspect;84:83–94.
SolterPF.Clinicalpathologyapproachestohepaticinjury.ToxicolPathol;33(1):9–16.
YangRZ,BlaileanuG,HansenBC,etal.cDNAcloning,genomicstructure,chromosomalmapping,andfunctionalexpressionofanovelhumanalanineaminotransferase.Genomics;79(3):–50
LindblomP,RafterI,CopleyC,etal.Isoformsofalanineaminotransferasesinhumantissuesandserum-differentialtissueexpressionusingnovelantibodies.ArchBiochemBiophys;(1):66–77.
EnnulatD,WalkerD,ClemoF,etal.Effectsofhepaticdrug-metabolizingenzymeinductiononclinicalpathologyparametersinanimalsandman.ToxicolPathol;38(5):–28.
StockhamSL,ScottMA.Enzymes.In:ThrallMA,editor.Fundamentalsofveterinaryclinicalpathology.2ndedition.Ames(IA):IowaStatePress;.p.–75.Chapter12.
ComazziS,PieralisiC,BertazzoloW.Haematologicalandbiochemicalabnormalitiesincanineblood:frequencyandassociationsinsamples.JSmallAnimPract;45(7):–9.
LidburyJA,SteinerJM.Liver-diagnosticevaluation.In:WashabauRJ,DayMJ,editors.Caninefelinegastroenterology.StLouis(MO):Elsevier;.p.–75.Chapter61.
ChapmanSE,HostutlerRA.Alaboratorydiagnosticapproachtohepatobiliarydiseaseinsmallanimals.VetClinNorthAmSmallAnimPract;43(6):–25.
KutzlerMA,SolterPF,HoffmanWE,etal.Characterizationandlocalizationofalkalinephosphataseincanineseminalplasmaandgonadaltissues.Theriogenology;60(2):–.
SaneckiRK,HoffmannWE,DornerJL,etal.Purificationand
